人酪氨酸羟化酶和胶质细胞源性神经营养因子双转基因工程细胞对MN9D细胞内多巴胺含量的影响

• 作者: 吴承远 张文华 王晓民
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 帕金森病 多巴胺 酪氨酸羟化酶 胶质细胞源性神经营养因子 基因工程
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 335-337
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2571字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1001-9030.2005.03.029

摘要

目的建立一种可同时高效稳定表达酪氨酸羟化酶(TH)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的双基因工程细胞,探讨其在帕金森病(PD)基因治疗中的作用.方法应用分子克隆技术构建真核表达载体PcDNA3.1/hGDNF和PcDNA3.0/hTH,并同时转染至SH-SY5Y细胞系,利用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定筛选出的阳性细胞克隆TH和GDNF的表达水平,将双转工程细胞与MN9D细胞共培养,高效液相色谱分析工程细胞对MN9D细胞生长状态及细胞内单胺类递质含量的影响.结果双转基因工程细胞可防止MN9D细胞退变死亡,与对照组相比较,DA、HVA和DOPAC提高了1.9、2.1和1.7倍(P＜0.01).双转基因工程细胞可对抗MPP+对MN9D的毒性损伤作用,与对照组相比较,DA、HVA和DOPAC提高了3.3、1.7和2.0倍(P＜0.01),而且其效果明显优于TH单基因工程细胞.结论成功构建可分泌人TH和GDNF的双转基因工程细胞,其对多巴胺能神经元具有明显的保护作用,其在PD基因治疗中可能具有防治兼顾作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晓民	北京大学神经科学研究所	28	323	10.0	17.0