细胞因子诱导人脐血间充质干细胞分化过程中细胞巢蛋白、神经丝亚单位和端粒酶逆转录酶mRNA的表达

• 作者: 刘计荣 曹孟德 秦洁 许燕 邢莹 鄢文海 陈宗德 韩雪飞 龚光明
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: EGF bFGF 脐血 间充质干细胞 端粒酶逆转录酶 巢蛋白 神经丝亚单位M
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 250-253
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2812字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2005.02.022

摘要

目的:观察细胞因子EGF和bFGF联合诱导人脐血间充质于细胞(MSCs)向神经细胞分化过程中细胞巢蛋白(nestin)、神经丝亚单位M(NF-M)和端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的变化.方法:采集健康自然分娩产妇脐血,密度梯度离心分离单个核细胞(MNCs),PBS洗涤2次后重悬于含体积分数20%胎牛血清的DMEM/F12中,接种于T-75培养瓶内(细胞密度为1×106ml-1),一组加入细胞因子EGF和bFGF,终浓度各为10μg/L,另一组不加细胞因子,剩余细胞用液氮冻存.培养24 h倾去全部液体以除去未贴壁细胞,以后每3 d全量换液1次,倒置显微镜下观察细胞形态.分别收集培养1d、4d、7d、14d贴壁细胞和冻存细胞,采用RT-PCR方法检测nestin、NF-M、hTERT mRNA的表达.结果:未培养的脐血MNCs(内含MSCs)nestin、NF-M、hTERT mRNA均表达阳性.培养后nestin、hTERT mRNA表达下降,至第7 d已不能检出;而NF-M mRNA的表达随培养时间延长而增强.与对照组相比,细胞因子组NF-M mRNA表达较高,nestin、hTERT mRNA表达的下降趋势延迟.结论:细胞因子EGF和bFGF在联合诱导脐血MSCs分化为神经细胞的过程中,能下调hTERT mRNA的表达.