异种同源表皮生长因子受体EGFR胞外段在毕赤巴斯德酵母中的表达

• 作者: 文艳君 方芳 李炯 田聆 魏于全
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 表皮生长因子受体 胞外段 毕赤巴斯德 分泌表达
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 153-156
• 页数: 4页
• 分类号: Q7
• 字数: 2772字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2005.02.001

摘要

目的实现异种同源表皮生长因子受体EGFR胞外段在毕赤巴斯德酵母中的分泌性表达.方法将鼠和人的EGFR胞外段目的基因(mer,her)与分泌型毕赤酵母表达载体pPICZaA重组,构建了相应的重组表达质粒pPICZaA-mer和pPICZaA-her,用Sac I将重组质粒线性化后,电穿孔转化酵母菌株GS115,利用Zeocin筛选阳性克隆,挑出阳性克隆用甲醇小规模诱导表达后,进行SDS-PAGE分析及Western-blot检测,筛选高表达量的克隆作大规模诱导表达.结果获得了鼠和人的EGFR胞外段目的蛋白在毕赤巴斯德酵母中的分泌性表达,SDS-PAGE分析及Western-blot检测得到预期条带,相对分子质量约为95×103.免疫印迹分析表明,表达蛋白具有良好的抗原性和特异性.结论pPICZaA-mer和pPICZaA-her重组质粒在甲醇营养型酵母中可经甲醇诱导表达鼠和人的EGFR胞外段目的蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田聆		6	29	2.0	5.0
2	魏于全		5	18	2.0	4.0
3	文艳君		4	14	2.0	3.0
4	方芳		1	2	1.0	1.0
5	李炯		1	2	1.0	1.0