人血管内皮生长因子受体2胞外段在毕赤氏巴斯德酵母中的表达

• 作者: 侯健梅 左秋 文艳君 李炯 王永生 田聆 魏于全
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 人血管内皮生长因子受体2 毕赤氏巴斯德酵母 基因表达
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: Q812
• 字数: 666字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2006.01.001

摘要

目的探讨在毕赤氏巴斯德酵母(Pichia pastoris)中高效表达有真核蛋白结构的人血管内皮生长因子受体2胞外段(heVEGFR-2)的可行性.方法从重组质粒pORF-heVEGFR-2经PCR获全长heVEGFR-2 DNA,构建重组毕赤氏巴斯德酵母分泌性表达载体,电转化Pichia pastoris X-33.用抗药性表型和甲醇诱导筛选出重组heVEGFR-2蛋白表达阳性的转化子(X-33-heVEGFR-2).结果SDS-PAGE显示,获分子量约108 kDa的重组heVEGFR-2蛋白,约占X-33-heVEGFR-2分泌性表达蛋白总量的45%.该重组蛋白在表达上清中的质量浓度达80 mg/L.其heVEGFR-2部分分子量约106 kDa.Westernblot证实,该蛋白能特异地与大鼠抗小鼠VEGFR-2单克隆抗体结合.结论毕赤氏巴斯德酵母能高效表达有真核蛋白结构的人血管内皮生长因子受体2胞外段蛋白全段.