利用Red系统快速改构含鼠β-酪蛋白基因的细菌人工染色体

• 作者: 王恒梁 贾玉艳 辛艳丽 邓继先
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 细菌人工染色体 λRed重组系统 β-酪蛋白基因 FLP
• 年，卷（期）: 2005,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 45-50
• 页数: 6页
• 分类号: Q81
• 字数: 3954字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2005.08.009

摘要

采用Red系统介导的同源重组方法对含有鼠β-酪蛋白基因的RPCI23-440C1 BAC进行快速改构.首先通过PCR方法,获得两端带有鼠β-酪蛋白基因同源序列的tPAm-Zeo同源重组片段,然后将此同源重组片段电击转化至已含有编码Red重组酶质粒的RPCI23-440C1 BAC菌中,在λRed重组系统的帮助下,通过同源重组片段两端与RPCI23-440C1中β-酪蛋白同源的序列在菌体内与β-酪蛋白基因发生同源重组,将其置换.最后利用Zeocin抗性基因两侧的FRT位点,通过FLP位点专一性重组将抗性基因剔除.经Southern blot和序列分析鉴定表明,获得了重组正确且无编码两种重组酶质粒的tPAm-RPCI23-440C1 BAC克隆.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓继先	军事医学科学院生物工程研究所	72	564	13.0	19.0
2	辛艳丽	军事医学科学院生物工程研究所	2	9	2.0	2.0
3	王恒梁	军事医学科学院生物工程研究所	5	18	2.0	4.0