细菌人工染色体携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白重组体的构建

• 作者: 刘志强 孙德旭 李小翠 王晓天 秦苏萍
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 生物学
• 关键词: FGF18 绿色荧光蛋白 细菌人工染色体 同源重组
• 年，卷（期）: 2013,（19）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 11-14
• 页数: 4页
• 分类号: Q816
• 字数: 3381字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2013.19.004

摘要

目的 构建由细菌人工染色体(BAC)携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白(GFP)的重组体,用于生产转基因小鼠,筛选表达FGF18的特定细胞.方法 分别克隆FGF18基因启动子区域的5’同源臂和3’同源臂,插入到pBS-GFP-kan质粒的左右两段,构建携带FGF18同源臂的质粒.提取含有FGF18基因全长的bMQ-282D14 BAC,转化到SW105细菌中并筛选阳性克隆,之后再将带有FGF18基因同源臂的pBS-GFP-Kan质粒转化到该细菌内,在42℃实现基因同源重组,将GFP基因插入到FGF18基因的启动子区.结果 经过氯霉素与卡那霉素的正负筛选,选出FGF18-GFP阳性的菌株,提取出构建好的BAC.结论 成功构建了BAC携带的FGF18-GFP重组体,可用于转基因小鼠生产.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李小翠	徐州医学院病原微生物学教研室	25	77	5.0	6.0
2	王晓天	徐州医学院病原微生物学教研室	10	29	3.0	5.0
3	秦苏萍	徐州医学院病原微生物学教研室	21	39	4.0	5.0
4	孙德旭	徐州医学院人体解剖学教研室	9	3	1.0	1.0