趋化因子MIP-3α的克隆与表达

• 作者: 沈大斌 罗福康 郑红
• 来源期刊: 局解手术学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: MIP-3α 融合表达 载体 Western blot 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 91-93
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 3071字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5042.2005.02.009

摘要

目的克隆人趋化因子MIP-3α基因,表达并初步纯化MIP-3α融合蛋白.方法从扁桃体中提取总RNA,再进行RT-PCR,扩增MIP-3α成熟蛋白基因,并在5'和3'分别添加NcoI和EcoRI酶切位点,通过这两个酶切位点重组于pET32a(+)载体上,转化E.coli.DH5α,筛选阳性克隆,酶切鉴定,DNA测序检测插入序列的正确性,缺失突变获得MIP-3α天然蛋白表达载体pET32a(+)/MIP-3α,SDS-PAGE分析其表达,Western blot验证融合蛋白.大量表达并初步纯化MIP-3α融合蛋白.结果成功克隆了MIP-3α基因,表达并初步纯化得到MIP-3α融合蛋白.结论构建的MIP-3α硫氧还蛋白融合表达载体以可溶性蛋白的方式表达MIP-3α硫氧还蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑红	第三军医大学附属西南医院实验研究中心	36	309	9.0	16.0
2	罗福康	第三军医大学附属西南医院实验研究中心	14	74	4.0	8.0
6	沈大斌	第三军医大学附属西南医院实验研究中心	5	8	2.0	2.0