钩端螺旋体OmpL1抗原表位预测、克隆和表达

• 作者: 俞建昆 杨榆玲 石铁流 褚嘉祐 郭晓奎 黄小琴
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: OmpL1 抗原表位 钩端螺旋体
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 27-31
• 页数: 5页
• 分类号: R377
• 字数: 4837字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2005.01.008

摘要

目的应用生物信息学方法预测钩体外膜蛋白OmpL1的表位,结合基因工程手段进行表位重组、表达和分离纯化.方法用预测程序ProPred和 ANTIGENIC预测OmpL1的表位,PCR合成重组表位基因片段,克隆PCR产物构建表达质粒pGEX/Omp-Omp,测序验证.对含有该质粒的大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,表达产物western blot分析并纯化融合蛋白. 结果预测到2个既具有MHC结合肽特性又具有B细胞表位特征的肽段.重组表位基因序列与理论设计完全一致.IPTG诱导BL21(DE3)中高效表达Mr约30 000的融合蛋白,纯化后蛋白纯度＞90%. 结论成功构建原核表达质粒pGEX/Omp-Omp,并进行含重组表位的GST融合蛋白的分离纯化,为OmpL1的表位研究和应用于亚单位疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	石铁流	上海第二医科大学病原生物学教研室	1	4	1.0	1.0
2	黄小琴	中科院上海生命科学信息中心	1	4	1.0	1.0