抗Caspase-12核酶的制备与体外活性鉴定

• 作者: 俞红 周霞秋 姜山 张(韦华) 谢青 金由辛
• 来源期刊: 中华肝脏病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 核糖核酸酶 转录 Caspase-12 活性鉴定
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 其他肝病
• 页码范围: 121-124
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 3482字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1007-3418.2005.02.011

摘要

目的设计针对小鼠内质网应激凋亡途径中Caspase-12 mRNA的锤头状核酶(Rz138、Rz218),通过靶基因及核酶的体外转录、切割,进行核酶活性鉴定,评估其应用前景.方法小鼠Caspase-12基因的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增片段克隆于PGEM-T载体的T7启动子下游,通过α-32p UTP标记的体外转录物作为靶RNA.设计合成针对小鼠Caspase-12 mRNA的核酶,通过PCR方法扩增核酶的转录模板,采用非同位素标记法行体外转录,核酶与靶RNA进行体外切割实验.结果在37℃,Rz138、Rz21g均有切割活性,Rz138的切割效率较高,几乎100%.结论 Rz138在体外具有良好的特异催化切割活性,它有望通过切割Caspase-12 mRNA而抑制内质网应激介导的细胞凋亡发生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金由辛	中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所	82	394	11.0	16.0
2	俞红	上海第二医科大学附属瑞金医院感染科	29	328	10.0	17.0
3	周霞秋	上海第二医科大学附属瑞金医院感染科	75	1071	16.0	31.0
4	谢青	上海第二医科大学附属瑞金医院感染科	62	562	14.0	21.0
5	张(韦华)	上海第二医科大学附属瑞金医院感染科	4	9	2.0	3.0
6	姜山	上海第二医科大学附属瑞金医院感染科	7	131	5.0	7.0