表达人KIAA1173基因的鼻咽癌6-10B细胞模型的建立

• 作者: 姚开泰 张三泉 张进华 胡海 蒋会勇 赵彤 韩西群
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: KIAA1173基因 鼻咽肿瘤 转染 细胞模型
• 年，卷（期）: 2005,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1629-1631
• 页数: 3页
• 分类号: R73
• 字数: 2916字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2005.12.018

摘要

目的建立表达人KIAA1173基因的鼻咽癌6-10B细胞模型,为探究人KIAA1173基因在鼻咽癌发病机制中的作用奠定实验基础.方法从新鲜肌肉组织中提取总RNA,采取逆转录PCR(RT-PCR)得到人KIAA1173基因cDNA,纯化PCR产物,与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,转化,铺极,筛选阳性克隆,酶切鉴定并进行序列测定.将重组质粒pcDNA3.1(+)-KIAA1173和空载体利用阳离子脂质体介导转入鼻咽癌6-10B细胞,经G418筛选阳性克隆.用RT-PCR、原位杂交及免疫细胞化学方法检测KIAA1173基因在6-10B细胞中的稳定表达情况.以空白质粒转染组作为对照.结果重组质粒pcDNA3.1(+)-KIAA1173经酶切和DNA测序分析显示与GenBank所公布的相应序列相符,插入方向正确,阅读框架完整.转染KIAA1173基因的6-10B细胞阳性克隆在mRNA和蛋白水平证实,转染细胞内有该基因高表达,表明细胞可表达人KIAA1173基因.结论成功获得了人KIAA1173基因全长cDNA的基因克隆,将该基因导入鼻咽癌6-10B细胞后,获得生物学活性稳定的KIAA1173基因高表达的细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚开泰	南方医科大学南方医院病理科	65	406	11.0	16.0
2	张进华	南方医科大学南方医院病理科	20	123	6.0	10.0
3	张三泉	南方医科大学南方医院病理科	7	53	4.0	7.0
4	胡海	南方医科大学南方医院病理科	4	4	2.0	2.0
5	赵彤	南方医科大学南方医院病理科	75	334	11.0	14.0
6	韩西群	南方医科大学南方医院病理科	28	104	5.0	9.0
7	蒋会勇	南方医科大学南方医院病理科	14	100	7.0	9.0