兔骨髓间充质干细胞的分离计量和生物学特点观察

• 作者: 周强 李起鸿 许建中
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 间充质干细胞 组织工程 细胞培养 种子细胞
• 年，卷（期）: 2005,（16）
• 所属期刊栏目: 专题报道:骨组织工程
• 页码范围: 1628-1630
• 页数: 3页
• 分类号: R322.71|R329-33|R329.28
• 字数: 3449字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2005.16.002

摘要

目的建立骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)分离获取效果的计量方法;观察骨髓MSCs在体外传代培养条件下的主要生物学特点.方法①梯度离心分离幼兔骨髓有核细胞,培养分离MSCs,以每106个骨髓有核细胞收获第1代MSCs的数计量MSCs的收获效率;②传代培养,倒置显微镜及组织学光镜观察细胞形态、生长特点、Ⅰ型胶原合成及碱性磷酸酶活性等方面的变化.结果①以2.5×105/cm2的密度接种骨髓有核细胞,经9～10 d培养可收获第1代MSCs;第1代MSCs的收获总量和骨髓有核细胞的收获量呈显著的正相关(r=0.932,P＜0.05),每106个骨髓有核细胞平均可收获第1代MSCs约29.4×104个.②骨髓MSCs为长梭形,呈紧密排列的漩涡状生长,在传代培养中生物学特性无明显变化,均质性明显提高,各代Ⅰ型胶原免疫组化均为阳性,碱性磷酸酶染色为阴性.结论①以2.5×105/cm2的骨髓有核细胞接种密度,收获第1代MSCs所需时间较短.②以每106个骨髓有核细胞可收获第1代MSCs的数量来计量骨髓MSCs的收获效率是可行的.③骨髓MSCs在体外培养条件下生物学特性稳定,经传代可收获高均质性的细胞.