摘要:
目的:探讨脉冲电磁场在成骨细胞-破骨细胞共育培养体系中对成骨细胞的影响.方法:实验于2004-03/09在江西博士生物制品公司细胞生物实验室完成.体外分离、培养1 d龄SD乳鼠颅骨成骨细胞和四肢骨破骨细胞,利用共育培养板将二者培育在同一环境中;分处理组、空白对照组、阳性对照组3组.处理组共育培养体系施加50Hz,8 Gs的脉冲电磁场,1 h/d;空白对照组置于同样线圈下而不通以电流;阳性对照组加入成骨细胞促增殖剂氟化钠(1×10-5mol/L);处理7 d后观察各组成骨细胞增殖、凋亡、碱性磷酸酶活性变化,处理15 d后进行矿化结节测定.结果:①各组成骨细胞增殖情况:合成后期+合成期细胞比率处理组和阳性对照组明显高于空白对照组[(12.34±1.85)%,(14.10±1.40)%,(9.57±1.05)%,x2=4.25,P<0.01];而处理组和阳性对照组之间差别不显著(P>0.05).②细胞凋亡情况:处理组和阳性对照组明显低于空白对照组(0.027 6±0.005 9)%,(0.285 3±0.013 3)%,(0.038 6±0.003 1)%,x2=3.86,P<0.01);而处理组和阳性组之间亦无显著差别(P>0.05).③碱性磷酸酶活性:经脉冲电磁场作用以后,处理组培养上清碱性磷酸酶活性与空白对照组相比,有一定的升高[(3 174±533),(3 019±583)nkat/L,t=5.63,P<0.01],而与阳性组之间的差异无显著性意义(P>0.05).④钙化结节结果:各组每40倍视野下矿化结节平均数量和单个结节平均面积亦均有显著的差异(x2=3.45,t=6.33,P<0.01),其大小排序为:处理组>阳性组>空白对照组.结论:一定频率和强度的脉冲电磁场对体外共育培养的成骨细胞具有明显的促增殖、促分化及促矿化功能.①经脉冲电磁场作用以后,成骨细胞周期发生了改变,DNA合成和细胞分裂增加,促进了复合培养体系中成骨细胞的自然增殖,减少了成骨细胞的自然凋亡,其促增殖及降低细胞自然凋亡的效应同成骨细胞增殖促进剂氟化钠相当.②脉冲电磁场在促进成骨细胞由幼稚细胞向成熟分泌型细胞分化方面,有明显的促进作用.③经脉冲电磁场作用15 d后,共育体系成骨细胞室矿化率增加,成骨细胞矿化功能得以提高,同其经脉冲电磁场作用以后分化加速相适应.