B7-1转基因骨肉瘤疫苗的制备及鉴定

• 作者: 傅德皓 刘勇 宁旭 杨述华 梅荣成
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: B7基因 绿色荧光蛋白 肿瘤疫苗 骨肉瘤
• 年，卷（期）: 2005,（26）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 10-12
• 页数: 3页
• 分类号: R738.1
• 字数: 2817字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2005.26.004

摘要

目的构建含B7-1 基因与绿色荧光蛋白(GFP)基因的融合表达载体,转染LM8骨肉瘤细胞制备骨肉瘤疫苗.方法用RT-PCR法扩增B7-1基因片断,应用含GFP基因的真核表达质粒构建融合表达载体,酶切、测序鉴定构建质粒;采用脂质体介导方法将其转染到LM8细胞,并用荧光显微镜及LCM结合蛋白免疫印记检测其在肿瘤疫苗细胞中的表达.结果经PCR 及酶切鉴定,证实成功构建了含B7-1基因的真核表达重组体pEGFP-C1/B7,重组子测序结果与国际基因文库中mB7-1序列相符.用荧光显微镜观察到疫苗细胞中有GFP表达,RT-PCR检测到疫苗细胞中B7-1 基因的表达,westernblot发现疫苗细胞中有B7蛋白的表达.结论 B7-1重组真核绿色荧光表达载体pEGFP-C1/B7已成功构建,转染LM8细胞成功制备了骨肉瘤细胞疫苗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨述华		562	4404	28.0	40.0
2	傅德皓		57	275	9.0	12.0
3	刘勇		158	1356	20.0	28.0
4	梅荣成		10	42	4.0	6.0
5	宁旭		5	36	3.0	5.0