Rasfonin抑制骨肉瘤细胞143B的增殖和迁移

• 作者: 张帆 燕太强 郭卫
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: 骨肉瘤 增殖 迁移 自噬
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 234-238
• 页数: 5页
• 分类号: R738.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.19723/j.issn.1671-167X.2019.02.006

摘要

目的:研究真菌次级代谢产物rasfonin对骨肉瘤143B细胞增殖与迁移能力的影响.方法:以骨肉瘤细胞系143B为模型,利用3-(4,5-二甲基)-5-(3-羧甲基苯环)-2-(4-硫基苯)-2H-四唑盐复合物检测法[3-(4,5-dime-thylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,inner salt,MTS]观察rasfonin对细胞活性的影响,以二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)组为对照,采用rasfonin(3μmol/L和6μmoL/L)处理12或24 h,观察143B细胞活性的变化;采用克隆形成实验检测rasfonin对细胞集落形成能力的影响,以DMSO组为对照,采用rasfonin(3μmol/L)处理1周,对比两组克隆形成数目.划痕实验及侵袭实验检测rasfonin对细胞侵袭迁移能力的影响,以DMSO组为对照,采用rasfonin(3μmol/L)处理24 h,对比两组的伤痕愈合率及侵袭细胞数.以DMSO组为对照,透射电子显微镜观察rasfonin(3μmol/L)处理4h后细胞内自噬体含量的变化.蛋白免疫印迹的方法检测rasfonin对p62蛋白(sequestosome 1)、微管相关蛋白1轻链3融合蛋白(microtubule associated protein 1 light chain 3 fusion protein,LC3)及聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶[poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1]表达的影响.结果:在12和24 h,随着rasfonin浓度的升高,骨肉瘤143B细胞的细胞活性均逐渐降低,3组间差异有统计学意义(12 h:F=31.36,P＜0.01;24 h:F=67.07,P＜0.01),任意两组间比较差异也均有统计学意义(P＜0.01).3μmol/L的rasfonin可以显著抑制143B细胞的集落形成能力(D＜0.01).Rasfonin处理后,143B细胞在24 h内的伤痕愈合比率明显低于DMSO对照组(33.91％ ±0.83％ vs.65.11％ ±0.94％,P＜0.01);同样24 h内穿过覆盖有Matrigel的基底膜的细胞数明显低于DMSO对照组[(21.33±1.45)个 vs.(49.33 ±2.40)个,P＜0.01].Rasfonin处理4h后骨肉瘤143B细胞中自噬体增多,p62水平降低,LC3-Ⅱ累积,自噬抑制剂氯喹存在条件下LC3-Ⅱ累积更为明显,并且随着rasfonin浓度的提高PARP-1的切割增多.结论:Rasfonin既可以抑制骨肉瘤143B细胞的增殖迁移,还可以引起细胞的自噬与凋亡,这些结果为rasfonin作为骨肉瘤新的治疗药物提供了初步的实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张帆	北京大学人民医院骨肿瘤科	64	224	7.0	12.0
3	郭卫	北京大学人民医院骨肿瘤科	271	1966	21.0	29.0
6	燕太强	北京大学人民医院骨肿瘤科	55	343	10.0	14.0