人胰岛素样生长因子1前体基因的重组、表达及纯化

• 作者: 刘莉 姜苏蓉 程蕴琳 陈晨
• 来源期刊: 江苏医药
• 学科: 医学
• 关键词: 人胰岛素样生长因子1前体 基因 抗原性
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 136-138
• 页数: 3页
• 分类号: R5
• 字数: 2545字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-3685.2006.02.015

摘要

目的构建含有人胰岛素样生长因子1(hIGF-1)前体编码基因的重组载体,在E.coliBL21中表达,并探讨其抗原性和应用价值.方法用PCR法,从现有重组质粒pBakPAK 8/hIGF-1中,扩增编码hIGF-1前体的基因片段,经双酶切、纯化、连接后得到pET29a(+)/hIGF-1重组体,再将其转化大肠杆菌BL21-CodonPlus并诱导表达.表达产物经镍柱亲和层析纯化后,用Western blot法检测重组蛋白的抗原活性.结果重组持粒pET29a(+)/hIGF-1经双酶切鉴定和测序分析证实构建成功.在大肠杆菌BL21-CodonPlus中经IPTG诱导表达,有一相对分子质量15 000的重组蛋白hIGF-1前体,该蛋白经镍柱亲和层析获得了良好的纯化效果,具有特异的抗原活性.结论成功地克隆并表达相对分子质量为15 000的hIGF-1前体编码基因,为进一步制备抗hIGF-1抗体和后续hIGF-1生物学功能研究打下了良好基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘莉	南京医科大学第一附属医院老年医学科	90	375	9.0	15.0
2	姜苏蓉	南京医科大学第一附属医院老年医学科	11	62	5.0	7.0
3	陈晨	南京医科大学第一附属医院老年医学科	66	265	9.0	12.0
4	程蕴琳	南京医科大学第一附属医院老年医学科	86	449	11.0	15.0