霍乱弧菌O139 mshA基因的克隆、表达及免疫反应性鉴定

• 作者: 尹铁球 彭颖 曾爱兵 杜季梅 楼永良
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 霍乱弧菌O139 mshA基因 克隆 表达 免疫反应性
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 403-406
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2661字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2006.05.005

摘要

目的克隆霍乱弧菌O139临床菌株的甘露糖敏感血凝素(Mannose-Sensitive Hemagglutinin,MSHA)基因,构建原核表达系统,鉴定重组表达产物的免疫反应性.方法高保真PCR扩增mshA基因,T-A克隆后测定核苷酸序列并构建原核表达系统pET-28a(+)-mshA-E.coli BL21(DE3),IPTG诱导目的重组蛋白(rMSHA)表达、Ni-NTA亲和层析法收集蛋白;Western blot鉴定其免疫反应性.结果所克隆的mshA基因与GenBank报道的(AE004128)序列完全一致.构建的mshA基因原核表达系统pET-28a(+)-mshA-E.coli BL21(DE3)表达量占细菌总蛋白的20%以上.表达的蛋白(约20kD)可与His单克隆抗体发生特异性免疫结合.结论成功构建了霍乱弧菌O139mshA基因的高效原核表达系统,表达的rMSHA蛋白有良好的免疫反应性,为进一步研制MSHA及其抗体检测试剂盒奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	楼永良	温州医学院检验医学院	57	229	8.0	12.0
2	杜季梅	温州医学院检验医学院	42	126	6.0	9.0
3	彭颖	温州医学院细胞与分子医学研究所	29	167	7.0	12.0
4	曾爱兵	温州医学院生物学实验教学中心	21	55	4.0	6.0
5	尹铁球	温州医学院检验医学院	2	1	1.0	1.0