双基因shRNA干扰乙酰肝素酶在卵巢癌细胞中表达的实验研究

• 作者: 刘玉 张潍 毛敬 辛晓燕
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢肿瘤 RNA干扰 肿瘤细胞,培养的 乙酰肝素酶 SKOV3细胞
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 984-989
• 页数: 6页
• 分类号: R730.5|R737.31
• 字数: 4364字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2006.11.005

摘要

目的:采用编码2条短发卡式RNA(shRNA)的抗乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)特异性载体干扰卵巢癌细胞中Hpa的表达,观察其对肿瘤生长转移的抑制作用.方法:以脂质体介导的方法将自行设计和构建的抗Hpa短发卡式RNA(Hpa-shRNA)基因真核表达载体稳定转染人卵巢癌细胞SKOV3;流式细胞仪鉴定转染效率,免疫组化和实时定量RT-PCR检测转染前后卵巢癌细胞中Hpa蛋白和mRNA表达,Boyden小室观测细胞增殖和侵袭能力的变化,透射电镜观察卵巢癌细胞超微结构改变.结果:Hpa mRNA表达在SKOVa-Hpa(转染Hpa)明显升高(P＜0.01),SKOV3-Hpa shRNA(转染Hpash RNA)显著降低(P＜0.01),SKOV3 DZ-shRNA(转染非特异性sh RNA片段)和SKOV3无显著性差异(P＞0.05).电镜下,SKOV3-Hpa组Hpa蛋白表达最为明显,SKOV3-Hpa shRNA Hpa蛋白则最低,各组间比较差别有显著性意义(P＜0.01).SKOV3-Hpa细胞器发达,细胞表面绒毛丰富,细胞间连接稀少.SKOV3 Hpa-shRNA以变形为主,细胞表面绒毛少,细胞器不发达,部分见线粒体皱缩,肿胀和空泡样改变.SKOV3-Hpa、SKOV3-DZ-shRNA和SKOV3-Hpa-shRNA 3种细胞穿过人工基底膜的细胞数分别为82.3±9.16,36.1±8.73和18.6±10.5,各组间比较有显著性差异(P＜0.01).结论:双基因Hpa特异性shRNA可显著抑制卵巢癌细胞Hpa表达,降低细胞侵袭能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	辛晓燕	第四军医大学西京医院妇产科	297	1601	18.0	24.0
2	张潍	第四军医大学西京医院妇产科	23	69	5.0	6.0
3	刘玉	第四军医大学西京医院妇产科	26	125	6.0	9.0
4	毛敬	第四军医大学西京医院妇产科	7	24	3.0	4.0