TRKC基因体外转染大鼠神经干细胞的方法

• 作者: 吴惺 周良辅 张荣 杨卫忠 梁日生 毛颖
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 神经营养素-3 酪氨酸激酶C 神经干细胞 基因转染
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1239-1243
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 2908字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2006.11.016

摘要

目的 探讨体外转染TRKC基因的神经干细胞的制备方法.方法 利用自行合成的引物进行PCR反应,定向克隆构建TRKC-cDNA质粒并进行DNA测序分析,将pEGFP-C1质粒和TRKC-cDNA质粒进行酶切、重组,构建出pEGFP-C1-TRKC质粒.用脂质体将重组质粒转染到体外培养的大鼠神经干细胞中.用Western blot、免疫荧光和MTr法观察转染基因的表达和转基因后神经干细胞的增殖活性.结果 成功构建了TRKC-cDNA质粒,DNA测序证明所获得的目的基因与公布序列的一致性为99%,所获得的重组子符合研究要求.pEGFP-C1-TRKC质粒转染到神经干细胞后,宿主细胞能高效、稳定地表达目的基因产物GFP和TRKC.在NT-3作用下转TRKC基因神经干细胞的增殖活性有明显增强.结论 以质粒为载体、脂质体为介导可成功地把TRKC基因转染到神经干细胞内,转染基因表达好且具有功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毛颖	复旦大学华山医院神经外科	113	982	16.0	25.0
2	周良辅	复旦大学华山医院神经外科	167	1471	18.0	28.0
3	杨卫忠	福建医科大学协和医院神经外科	138	368	10.0	12.0
4	张荣	复旦大学华山医院神经外科	30	150	7.0	11.0
5	梁日生	福建医科大学协和医院神经外科	41	133	8.0	9.0
6	吴惺	复旦大学华山医院神经外科	38	271	12.0	15.0