链亲和素-磁性微粒的制备及其应用

• 作者: 唐一通 崔亚丽 崔婷 张志锋 朱宏莉 耿婷婷 陈超
• 来源期刊: 中国科学B辑
• 学科: 化学
• 关键词: 链亲和素 磁性微粒 制备 应用
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 页码范围: 353-360
• 页数: 8页
• 分类号: O6
• 字数: 7369字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1006-9240.2006.04.012

摘要

通过物理吸附和共价作用机制,制备两种链亲和素-磁性微粒,即链亲和素-金磁微粒和链亲和素-氨基磁粒,并对其在不同缓冲液中的稳定性进行研究;采用酶抑制法测定两种链亲和素-磁性微粒对游离生物素的结合能力;分别以紫外吸收和固相核酸杂交方法,测定两种链亲和素-磁性微粒对生物素标记寡核苷酸探针的固定化容量及活性,并与Dynabeads(R)M-270 Streptavidin进行比较.结果表明:通过物理吸附作用制备的链亲和素-金磁微粒,适用于核酸杂交与检测常用的STE(Tris-NaCl-EDTA)缓冲系统,通过共价作用形成的链亲和素-氨基磁粒,适用于STE和磷酸盐(PBS)缓冲系统;1 mg链亲和素-金磁微粒和链亲和素-氨基磁粒对游离生物素的最大结合容量分别为4950和5115 pmol;对生物素标记寡核苷酸探针(24 mer)的结合容量分别为2839和2978 pmol,测定结果均是Dynabeads(R)M-270 Streptavidin的6～7倍;与FITC-标记互补寡核苷酸的杂交结果表明,固定于链亲和素-磁性微粒表面的寡核苷酸探针保持了较好的生物学活性.