过氧化氢诱导肠上皮干细胞DNA氧化损伤模型的建立

• 作者: 张苏展 彭佳萍 蔡善荣 郑树
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: DNA损伤/药物作用 细胞,培养的 DNA氧化损伤 肠上皮干细胞 过氧化氢 8-OhdG
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 366-369,376
• 页数: 5页
• 分类号: R730.231
• 字数: 2367字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2006.04.004

摘要

目的:探索建立过氧化氢诱导肠上皮细胞DNA氧化损伤模型,以便在体外进一步研究DNA氧化损伤在大肠癌发生发展中的作用.方法:过氧化氢以RPMI1640培养基稀释成100、50、10、5、1 μmol/L 5个浓度,以RPMI 1640培养剂作空白对照.作用人胎肠上皮干细胞不同时间(10 min、30 min、1 h、1.5 h、12 h、24 h)后,以MTT法检测细胞生存状况,以免疫组织化学方法检测DNA特异性氧化损伤产物8-羟-2-脱氧鸟苷(8-OhdG),用SPSS 10.0软件以线性回归方法检验肠上皮干细胞在不同时间的生存率变化趋势.结果:MTT活性检测结果表明,在10～30 min时,各浓度过氧化氢作用后的细胞活性较高,为60%～80%,但随时间推移,细胞活性下降,至24 h,降至30%左右,时间趋势检验表明,除100、50 μmol/L过氧化氢组和空白对照组外,其余各组的生存率随过氧化氢作用时间的延长,生存率下降,时间趋势差异具统计学意义.过氧化氢作用时间在10～30 min内,100、50 μmol/L组的细胞活性明显低于1～10 μmol/L组20%左右,但在1.0 h以上各组,虽然过氧化氢浓度不同,但在同一作用时间内细胞活性无明显差别.过氧化氢处理肠上皮细胞15 min后进行8-OhdG免疫组织化学检测,结果除对照组阴性外,其余各组肠上皮细胞在不同浓度过氧化氢作用后的胞核及胞浆染色均呈棕褐色,为阳性.结论:过氧化氢能诱导肠上皮细胞发生DNA氧化损伤,肠上皮细胞DNA氧化损伤模型的条件以1～10 μmol/L 过氧化氢作用10～30 min为宜.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑树	浙江大学医学院附属第二医院肿瘤研究所	227	2645	27.0	42.0
2	蔡善荣	浙江大学医学院附属第二医院肿瘤研究所	23	587	12.0	23.0
3	张苏展	浙江大学医学院附属第二医院肿瘤研究所	80	800	13.0	25.0
4	彭佳萍	浙江大学医学院附属第二医院肿瘤研究所	47	264	10.0	13.0