一种改进的显微注射用DNA片段的纯化方法

• 作者: 姚伟 姚汝强 扈荣良 王太一 王禄增 范志强
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 医学
• 关键词: DNA 纯化方法 显微注射 转基因小鼠
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 179-182
• 页数: 4页
• 分类号: R349.6
• 字数: 4311字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2006.03.005

摘要

目的 显微注射用DNA的纯度是影响转基因动物制备成功与否的重要因素,本文建立一种可行的适用于普通实验室的纯化DNA方法,替代普遍使用的试剂盒纯化方法.方法 分别使用酚-氯仿多次抽提法及常规的凝胶提取试剂盒纯化含有蚓激酶基因的DNA片段,通过显微注射技术将纯化的DNA片段导入小鼠受精卵的原核,制备转基因小鼠.根据转基因实验的结果对两种方法进行比较.结果 使用两种方法纯化DNA均能获得转基因小鼠.在DNA纯度及注射卵的存活率上,两种方法无明显差别;在移植卵的出生率及转基因阳性率上,抽提法优于试剂盒法.结论 本实验建立的抽提方法可以替代试剂盒方法纯化显微注射用DNA片段,在降低实验成本、简化实验条件及提高转基因阳性率方面具有优势.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王禄增	中国医科大学实验动物部	73	713	14.0	23.0
2	扈荣良	军事医学科学院军事兽医研究所	92	445	11.0	15.0
3	王太一	中国医科大学实验动物部	30	279	9.0	16.0
4	范志强	中国医科大学实验动物部	2	8	2.0	2.0
5	姚汝强	军事医学科学院军事兽医研究所	2	8	2.0	2.0
6	姚伟	军事医学科学院军事兽医研究所	8	81	4.0	8.0