柑桔黄龙病的常规PCR及荧光定量PCR检测

• 作者: 夏玉先 张利平 殷幼平 王中康 胡浩 覃健 赵云
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: Cadidatus Liberibacter asiaticus 黄龙病 SYBR Green I TaqMan 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2006,（12）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 2491-2497
• 页数: 7页
• 分类号: S4
• 字数: 5602字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2006.12.013

摘要

[目的]为柑桔黄龙病的早期诊断和寄主体内病原菌的动态监测提供一种稳定、可靠的检验检疫技术.[方法]利用亚洲韧皮杆菌核糖体蛋白基因rplJ/rplL设计了2对PCR引物CQULA03F/CQULA03R、CQULA04F/CQULA04R和1条TaqMan探针CQULAP1,以此为基础建立了常规PCR和TaqMan探针法、SYBR Green I荧光染料法两种荧光定量PCR(共3种)反应体系;确定了3种体系各自的检测灵敏度、特异性和准确性,据此对3种体系进行了比较;从2004年7月到2005年5月还利用常规PCR和TaqMan探针荧光定量PCR体系完成了对柑桔黄龙病病原菌在寄主体内的周年变化的动态监测.[结果]两种荧光定量PCR方法的灵敏度比常规PCR高出至少2～3个数量级,而TaqMan探针法由于使用了杂交探针,其特异性尤其可靠,另外两种定量PCR较小的产物片段使得它们具有更好的稳定性,加上荧光定量PCR方法本身受污染可能性小、操作简便等固有优势,使得前者更适合于柑桔黄龙病的检测.[结论]本研究建立的2种荧光定量PCR方法可以为柑桔黄龙病的病害早期诊断以及柑桔黄龙病病原菌近缘种的甄别提供准确、灵敏、快速的检验检疫技术.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王中康	重庆大学生物工程学院基因工程研究中心	57	766	16.0	25.0
2	夏玉先	重庆大学生物工程学院基因工程研究中心	33	531	11.0	22.0
3	胡浩	重庆大学生物工程学院基因工程研究中心	8	122	3.0	8.0
4	殷幼平	重庆大学生物工程学院基因工程研究中心	57	718	14.0	23.0
5	赵云	重庆大学生物工程学院基因工程研究中心	4	118	3.0	4.0
6	张利平	重庆大学生物工程学院基因工程研究中心	1	104	1.0	1.0