免疫磁珠分离技术纯化和检测泰泽氏病原体的研究

• 作者: 何静云 刘星 张丽芳 李红
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 免疫磁珠 泰泽氏病原体 血清学试验
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 126-131
• 页数: 6页
• 分类号: R378
• 字数: 5723字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2006.02.013

摘要

目的建立泰泽氏病原体(Ty)纯化方法,获得纯的菌体供抗原研究,为ELISA诊断抗原的制备提供依据;并尝试建立Ty隐性感染血清学抗原检查方法.方法选择特异性抗体包被磁珠,从感染大鼠肝脏中富集和纯化Ty;用SDS-PAGE和Western blot技术考察纯化Ty的蛋白和抗原图谱;同时用免疫磁珠分离技术(IMS)直接检查隐性感染大鼠肠道上皮细胞内的Ty.结果用辛酸-硫酸铵纯化的Ty单克隆抗体M5以0.5 μg/107 beads以上浓度包被抗IgG抗体预结合的磁珠4 h,可最大效率地富集Ty;分离反应进行1 h,敏感性达到103菌体/mL;吖啶黄染色镜检法可以直接、快速地观察到结合于磁珠上的细菌;抗原分析表明,IMS较好地去除了肝组织和真核细胞成分,纯化的Ty RJ株具有3个免疫优势的抗原成分,相对分子质量(Mr)分别为160×103、116×103、55×103;此外,IMS法可直接从隐性感染大鼠盲肠上皮细胞中检测到少量寄生的Ty.结论用IMS技术可有效地富集和纯化Ty,并可以作为Ty隐性感染血清学抗原检查的候选方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘星	中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所	23	113	6.0	9.0
2	李红	中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所	23	130	7.0	9.0
3	张丽芳	中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所	23	120	7.0	9.0
4	何静云	中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所	2	10	1.0	2.0