家蚕抗菌肽CD高效表达及其抗BmNPV感染作用

• 作者: 孟小林 徐智圣 徐进平 李伟灿 王健 鲁伟
• 来源期刊: 中国病毒学
• 学科: 生物学
• 关键词: 抗菌肽 活性表达 抗BmNPV感染
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 589-593
• 页数: 5页
• 分类号: Q789
• 字数: 4202字
• 语种: 英文

摘要

通过大肠杆菌JM109诱导家蚕,提取其脂肪体总mRNA后,通过RT-PCR 得到 cDNA,根据GenBank上家蚕抗菌肽 Cecropin D 的cDNA序列,设计并合成引物,然后PCR扩增得到 Cecropin D肽基因并克隆到pGEM-T载体中,经过EcoRΙ和 Xho I 酶切,连接并将Cecropin D肽基因插入pET32a表达载体中.用重组质粒pET32a- ecropin D 转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下,融合蛋白Trx-Cecropin D 以可溶形式得到高效表达,经SDS-PAGE检测显示分子量为23kDa与预期大小相符,表达量约为总蛋白的30%.融合蛋白经Ni2+ 柱纯化后通过肠激酶切割后释放为 Trx(18kDa)和 Cecropin D (5kDa),最后通过超滤管分离得到重组抗菌肽.通过抑菌实验测得重组CecropinD对于革兰氏阴性及阳性菌均有抑菌活性.并将重组Cecropin D 与家蚕病毒BmNPV作用混合4h后,一起投喂家蚕,发现病毒感染力有明显降低,说明其有抗病毒感染作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孟小林	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	38	344	10.0	16.0
2	徐进平	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	38	263	9.0	14.0
3	王健	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	100	611	12.0	20.0
4	鲁伟	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	30	208	9.0	13.0
5	李伟灿	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	1	9	1.0	1.0
6	徐智圣	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	1	9	1.0	1.0