鸡输卵管暂态表达人溶菌酶的研究

• 作者: 孙怀昌 朱秋菊 王劲松 王志跃 高波
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 鸡输卵管暂态生物反应器 重组人溶菌酶 表达 鉴定
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 546-549
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 4309字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2006.04.017

摘要

目的:建立暂态表达人溶菌酶(hLYZ)的鸡输卵管生物反应器,以寻求一种生产药用hLYZ的有效方法.方法:将hLYZ cDNA克隆入鸡输卵管特异表达载体pOV1和pOV2,将获得的重组表达载体pOV1LYZ和pOV2LYZ与一定比例的聚乙烯亚胺混合,经翅静脉注射产蛋鸡,用微球菌平板溶菌试验检测蛋清中的溶菌酶活性.结果:2个重组载体注射鸡的蛋清中均有rhLYZ的表达,pOV2LYZ的表达水平及维持时间优于pOV1LYZ.设立4个试验组,分别以不同剂量或注射次数的pOV2LYZ注射产蛋鸡,蛋清中重组酶的定量测定结果表明,1 mg/2次注射组的表达效果较好,最高表达量达750μg/mL蛋清,有效表达维持7 d左右,载体注射对鸡的产蛋等生理指标无明显影响.当初次载体注射鸡蛋清中的rhLYZ含量下降到注射前水平时,用同样的方法和剂量进行再次注射.结论:蛋清中的rhLYZ表达水平较初次载体注射有所提高,表达维持时间有所延长.用hLYZ特异抗体进行的Western印迹结果显示,表达在蛋清中的rhLYZ相对分子质量与天然hLYZ相同.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙怀昌	扬州大学兽医学院	138	1042	15.0	25.0
2	王志跃	扬州大学动物科学与技术学院	306	2293	19.0	32.0
3	王劲松	扬州大学兽医学院	58	251	9.0	13.0
4	朱秋菊	扬州大学兽医学院	14	30	4.0	5.0
5	高波	扬州大学兽医学院	64	338	9.0	15.0