水稻条斑病菌和白叶枯病菌致病相关基因的敲除

• 作者: 张桂英 王金生 龙菊英
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 水稻条斑病菌 水稻白叶枯病菌 基因敲除 LPS合成基因 无毒基因
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 页码范围: 50-56
• 页数: 7页
• 分类号: Q943.2
• 字数: 4332字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-2030.2006.02.011

摘要

wxocA、wxocB、wxocD、wxocE和wzt是水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola,Xooc)的脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS)合成基因,avrXa3是水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)的一个无毒基因.利用pBCSK(-)和pKNG101两个质粒的复制起点不被水稻黄单胞菌识别的特点,把wxocA、wxocD、wxocE和wzt的中心区域克隆在pBCSK(-)上,获得突变转化单元pBCSK∷ΔwxocA、pBCSK∷ΔwxocD、pBCSK∷ΔwxocE和pBCSK∷Δwzt.把wxocB和avrXa3基因的旁侧序列和一个氯霉素抗性基因cm构建在pKNG101上,获得突变转化单元pKNG101∷ΔwxocB和pKNG101∷Δavr.以电转化方式把这些LPS合成基因突变转化单元DNA转入Xooc菌株RS105,把无毒基因突变转化单元转入Xoo菌株PXO99,通过同源重组分别获得了RS105中5个lps相应基因突变体MwxocA、MwxocB、MwxocD、MwxocE、Mwzt和一个无毒基因的突变体PXO99Δavr.SDS-PAGE分析发现,lps突变体的O抗原或核心寡糖的合成被破坏.致病性分析结果显示,基因wxocB、wxocE和wzt与致病性有关,前两基因的突变导致细菌完全失去毒性,而后一基因的突变导致细菌部分丧失毒性.与PX099相比无毒基因突变体PXO99Δavr改变了原有的毒性表型,在IRBB50(Xa4/xa5)和Asominori(Xal7)上由较感转变为较抗表型.因此,本试验证明,以pBCSK(-)和pKNG101为载体敲除水稻条斑病菌和白叶枯病菌致病相关基因是可行的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王金生	南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室	60	1440	21.0	36.0
2	龙菊英	南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室	5	92	4.0	5.0
3	张桂英	南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室	1	10	1.0	1.0