外源基因在转基因小鼠中整合状况的分析

• 作者: 任兆瑞 曾溢滔 朱怡文 王舒 肖艳萍 颜景斌 黄淑帧
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 转基因小鼠 外源基因 整合 拷贝数 嵌合体
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 407-413
• 页数: 7页
• 分类号: Q3
• 字数: 4947字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2006.06.002

摘要

目的 研究外源基因在转基因小鼠及其家系中的整合状况.方法 采用PCR、定量PCR和荧光原位杂交(FISH)的方法对原代转基因小鼠中外源人凝血因子Ⅸ(HfⅨ)基因的整合和嵌合情况进行分析.使用PCR、直接测序法鉴定整合的外源基因多拷贝的连接方向和连接方式.结果 7个家系中F0-8、F0-10和F0-11的后代中阳性个体比例明显低于50%,3个原代小鼠DNA中HfⅨ基因拷贝数分别只有子代中的66.2%、18.8%和28.3%.F0-11小鼠各脏器中嵌合比差异极大,且未见胚系特异性分布.不同个体间整合拷贝数差异极大,最少的F0-69为单拷贝,最多的F0-10有43个拷贝.而整合位点分析发现外源基因在随机分布中仍呈现一定的趋向性.PCR和测序结果证明所有小鼠中外源基因多拷贝均为头尾连接,连接的机制以粘性末端介导的连接为主,F0-13中还存在同源序列配对、断裂、修复介导的头尾连接.结论 在整合有HfⅨ基因的转基因小鼠中多拷贝外源基因多以粘性末端介导的头尾连接方式整合在染色体的某些特定区域.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任兆瑞		15	116	4.0	10.0
2	黄淑帧		17	215	6.0	14.0
3	朱怡文		2	3	1.0	1.0
4	颜景斌		11	157	5.0	11.0
5	肖艳萍		6	83	3.0	6.0
6	王舒		8	33	3.0	5.0