外源基因在转基因玉米中的整合位点分析

• 作者: 刘允军 刘艳 王翠云
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 转基因玉米 外源基因 整合位点 TAIL-PCR
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0756

摘要

玉米是我国第一大作物,在保障我国粮食安全中发挥重要作用.通过转基因技术培育具有抗病虫等性状的转基因玉米新品种,可有效减少产量损失.培育的转基因玉米需要鉴定外源基因整合位点,为转基因玉米的安全性评价提供重要依据.以一个抗虫转基因玉米事件IE34为材料,采用热不对称PCR(TAIL-PCR)和遗传定位方法,鉴定外源基因整合位点及旁侧序列.通过TAIL-PCR得到一段长度为776 bp的玉米基因组序列.分别在旁侧序列和外源基因上游序列设计特异性引物,建立了转基因玉米事件特异性的PCR鉴定方法.将旁侧序列在MaizeGDB中进行比对分析,发现此序列是重复序列而且存在于多条染色体上.构建转基因玉米IE34与自交系B73的F2代遗传分离群体,通过BSR-Seq方法确定外源基因整合在玉米第5染色体短臂2.32-2.70Mb区间内.通过精细定位将外源基因整合位点缩小在第5染色体2.35-2.61 Mb约260 kb的区间内.本研究结果表明,对于整合位点旁侧序列复杂的转基因事件,TAIL-PCR结合遗传定位方法能够有效鉴定外源基因的整合位点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘艳	中国农业科学院作物科学研究所	38	249	9.0	14.0
2	刘允军	中国农业科学院作物科学研究所	12	84	6.0	8.0
3	王翠云	中国农业科学院作物科学研究所	1	1	1.0	1.0