聚合酶链反应扩增人动脉粥样硬化抗体全套可变区基因

• 作者: 于秀艳 孙敏莉 张柏根 张皓
• 来源期刊: 上海交通大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 聚合酶链反应 抗体可变区基因 T载体
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1260-1263
• 页数: 4页
• 分类号: Q503|R543.5
• 字数: 2708字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2006.11.018

摘要

目的 利用二次聚合酶链反应(PCR)扩增人动脉粥样硬化抗体全套可变区基因,并将其克隆到T载体进行测序验证.方法 收集50例动脉粥样硬化患者外周动脉血标本,密度梯度离心法分离淋巴细胞,TRIzol法提取总RNA,用逆转录-PCR扩增轻链可变区基因(包括VK和Vλ)和重链可变区基因(VH),分别酶切后克隆到T载体上,随机挑取2个克隆进行测序验证.结果 总RNA的纯度和完整性都较好,经过2次PCR成功扩增出了抗体全套轻、重链可变区基因.测序结果与已有的人抗体基因的序列高度同源.结论 该方法成功扩增出了人动脉粥样硬化抗体全套可变区基因,为下一步噬菌体单链抗体库的构建和筛选奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张皓	上海交通大学医学院仁济医院血管外科	80	527	14.0	19.0
2	张柏根	上海交通大学医学院仁济医院血管外科	48	362	10.0	17.0
3	孙敏莉	上海交通大学医学院仁济医院血管外科	14	151	5.0	12.0
4	于秀艳	上海交通大学医学院仁济医院血管外科	2	3	1.0	1.0