人乳腺癌全套抗体可变区基因的扩增与克隆

• 作者: 刘杰 吕勇刚 吴昱彤 窦科峰 药立波 赵爱志 陈刚 陶开山
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 聚合酶链式反应 乳腺癌 抗体基因 T载体
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 558-561
• 页数: 4页
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2004.06.011

摘要

目的扩增人乳腺癌抗体全套可变区基因,将其克隆到T载体来构建T载体文库.方法收集乳腺癌患者外周转移淋巴结30例,TRIzol法提取总RNA、纯化mRNA,行RT-PCR扩增,制备T载体,用于PCR产物的克隆.结果总RNA纯度高,完整性好,mRNA获得率为1%.经RT-PCR,VH、Vλ、Vκ的每一条5＇端引物均与其相应的3＇端引物成功地扩增出了可变区基因片段,轻、重链T载体库分别为1.7×108和3.5×108.结论所采用的引物能够100%扩增目的片段,T载体过渡能显著提高克隆效率,为噬菌体抗体库的构建和筛选奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	药立波	第四军医大学基础部生物化学教研室	160	1030	16.0	24.0
2	窦科峰	第四军医大学西京医院肝胆外科	539	2856	20.0	29.0
3	陶开山	第四军医大学西京医院肝胆外科	62	266	9.0	12.0
4	刘杰	第四军医大学基础部药理学教研室	58	407	11.0	16.0
5	赵爱志	第四军医大学西京医院肝胆外科	16	160	7.0	12.0
6	陈刚	西安交通大学第一医院血液科	95	591	13.0	20.0
7	吕勇刚	第四军医大学西京医院肝胆外科	27	83	6.0	6.0
8	吴昱彤	唐都医院信息科	1	3	1.0	1.0