基因工程乳腺癌特异性人单链抗体的表达与特性

• 作者: 张云 扬帆 李文辉 王树蕙 郭彩云
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺癌 人单克隆抗体CM-1 单链抗体
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 324-327，329
• 页数: 5页
• 分类号: R737.9|Q789
• 字数: 3200字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2002.04.008

摘要

研究解决分泌人单抗的杂交瘤细胞系难于稳定持久分泌抗体的难题,制备单链抗体,使单抗分子小型化,为进一步研究其在肿瘤诊断和治疗中的应用作准备.从分泌抗乳腺癌人单抗的杂交瘤细胞CM-1总RNA中,利用RT-PCR技术分别扩增出人单抗重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因,将扩增产物纯化后克隆于pGEM-T载体中,进行DNA测序和序列比较分析后,将两者共克隆于表达载体中诱导表达,利用斑点免疫印迹及竞争抑制法检测表达产物的抗原性. 所克隆的CM-1人单抗重链可变区和轻链可变区基因片段,分别属于人免疫球蛋白IgM Ⅲ亚群,和鼠κ轻链V亚群,ⅩⅦ家族,用斑点免疫印迹法检测可见表达产物能与人乳腺癌细胞特异结合;人CM-1单克隆抗体对此单链抗体与人乳腺癌细胞的结合有竞争性抑制作用,抑制率为75.7%.结论成功地制备了可特异结合乳腺癌细胞的CM-1单链抗体.