乳腺癌相关分子人乳腺珠蛋白基因的克隆及原核表达

• 作者: 刘秀娜 周娟 潘自铁 王仙园 胡川闽 赵力军
• 来源期刊: 护理研究
• 关键词: 人乳腺珠蛋白 乳腺癌 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 23-25
• 页数: 3页
• 分类号: R471
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-6493.2006.01.009

摘要

[目的]克隆乳腺癌相关分子人乳腺珠蛋白(human mammaglobin,hMAM)基因并诱导其表达,为后期研制乳腺癌早期诊断试剂盒奠定基础,从而为早期发现乳腺癌提供科学的监测方法.[方法]从乳腺癌组织提取总RNA,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增hMAM基因编码序列,将扩增产物克隆至PGEM-T载体中,DNA测序,用限制性内切酶切下目的基因,与相同酶切的表达载体pQE40连接、筛选、鉴定,构建pQE40-hMAM融合表达质粒,以硫代半乳糖苷(IPTG)诱导在大肠杆菌M15中表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达结果.[结果]琼脂糖凝胶电泳显示聚合酶链反应(PCR)扩增产物的分子量大小与预期相符.对重组质粒分析表明,插入片段的序列与文献报道hMAM基因编码序列一致.在IPTG的诱导下,M15重组菌高效表达出一个相对分子质量约为34 kD的产物.[结论]重组表达质粒pQE40-hMAM表达成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周娟		74	520	13.0	21.0
2	王仙园		54	506	11.0	21.0
3	刘秀娜		22	237	10.0	15.0
4	潘自铁		2	1	1.0	1.0