乙型肝炎病毒X蛋白转录抑制抑癌基因p53表达的研究

• 作者: 刘妍 张玲霞 徐东平 戴久增 李进
• 来源期刊: 中华实验和临床病毒学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎,病毒性,人 肝炎,乙型 蛋白p53 反式抑制
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 26-29
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 2534字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2006.01.008

摘要

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白对抑癌基因p53基因表达的调节作用.方法以寡核苷酸芯片技术筛选的HBx反式调节基因结果为基础,利用生物信息学技术确定抑癌基因p53的启动子区域(p53p),构建真核报告基因表达载体pCAT3-p53p;以该质粒单独及与pcDNA3.1(-)-X共转染HepG2细胞,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性.进一步采用半定量RT-PCR技术检测HBV X蛋白对p53基因表达的调节.结果成功构建报告载体pCAT3-p53p,克隆的p53启动子有顺式激活下游基因的活性;pCAT3-p53p与pcDNA3.1(-)-X共转染时CAT的表达活性明显下降,说明HBV X蛋白抑制p53基因启动子的转录.RT-PCR结果表明,转染了pcDNA3.1(-)-X的HepG2细胞中p53基因mRNA表达减少.结论HBV X蛋白在转录水平上反式抑制抑癌基因p53的表达,本实验不仅验证了基因芯片的筛选结果,而且为HBx在致肝细胞癌发生中的作用提供分子基础.