重组抑肽酶的生产工艺研究

• 作者: 吴梧桐 董剑
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 抑肽酶 凝血因子FXa 融合蛋白 复性
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 375-378
• 页数: 4页
• 分类号: Q815
• 字数: 2346字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2006.04.021

摘要

目的:优化融合表达抑肽酶基因工程菌的发酵条件,分离纯化抑肽酶.方法:设计3因素3水平的正交实验,考查玉米粉浓度、诱导时间和诱导剂乳糖浓度对菌体生长及蛋白表达的影响;在30 L发酵罐中进行中试放大试验;菌体经超声破壁和离心得到融合蛋白包涵体,经Bio-gel P30凝胶过滤纯化复性,用FXa切割,回收目的蛋白,最后用Resource RPC进行纯度验证.结果:融合蛋白的表达量为45%,包涵体复性率为70%以上,抑肽酶纯度为90%,总收率为32%,比活力为3.1 EPU/mg.结论:实现了含抑肽酶融合蛋白的较高表达,复性率及纯度达到较高水平,活力与天然产物相当.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴梧桐	中国药科大学生命科学与技术学院	256	2771	24.0	37.0
2	董剑	中国药科大学生命科学与技术学院	2	21	2.0	2.0