重组抑肽酶的表达纯化和活性测定

• 作者: 刘建宁 孙自勇 汤逢源 陆嵬 陈均勇 马志峰
• 来源期刊: 南京大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 抑肽酶 纤溶酶 表达 纯化 抑制
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 页码范围: 457-463
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 字数: 4059字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0469-5097.2007.05.001

摘要

抑肽酶是一种用途广泛的丝氨酸蛋白酶抑制剂.用基因重组技术将化学合成的抑肽酶基因插入表达载体pET28a,并转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导后,表达产物以包涵体形式存在于菌体内包涵体纯化后经复性及CM-阳离子交换层析后,从每升培养液可获得2.4 mg抑肽酶,纯度可达90%.活性测定结果显示,重组抑肽酶可竞争性抑制纤溶酶对小分子底物S2251的水解活性.抑制常数(Ki)为(0.6±0.3)nmol/L,与天然抑肽酶的抑制活性相似.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘建宁	南京大学分子医学研究所	31	169	7.0	12.0
2	孙自勇	南京大学分子医学研究所	17	93	6.0	9.0
3	陆嵬	南京大学分子医学研究所	1	2	1.0	1.0
4	马志峰	南京大学分子医学研究所	2	3	1.0	1.0
5	陈均勇	南京大学分子医学研究所	8	38	3.0	6.0
6	汤逢源	南京大学分子医学研究所	1	2	1.0	1.0