反义RNA抑制Survivin在人骨肉瘤细胞系MG63中表达的实验研究

• 作者: 张勇 李存孝 杨形涛 范清宇 马保安 黄立军
• 来源期刊: 中国矫形外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨肉瘤 Survivin 凋亡 基因治疗
• 年，卷（期）: 2006,（21）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1664-1667
• 页数: 4页
• 分类号: R730.23
• 字数: 3195字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8478.2006.21.021

摘要

[目的] 研究人骨肉瘤细胞MG63中反义RNA对Survivin表达的抑制作用.[方法] 培养骨肉瘤细胞MG63,采用RT-PCR的方法克隆人Survivin基因编码区cDNA.构建Survivin的反义诱导表达载体.转染MG63细胞,G418筛选稳定转染的细胞系.稳定转染的细胞系,以ZnSO4120 μmol/L诱导,HE染色、Survivin免疫细胞化学染色透射电镜等形态学观察.绘制生长曲线.RT-PCR检测各组细胞Survivin的表达.Annexin V法检测细胞凋亡.[结果] RT-PCR从MG63细胞mRNA扩增了Survivin编码区cDNA,约420 bp.构建了pMDNA3-anti-Survivin重组质粒.转染MG63细胞,G418 1 000μg/ml筛选4周后,建成稳定转染细胞系.通过ZnSO4 120 μmol/L诱导,电子显微镜观察可见MG63/pMDNA3-anti-Survivin细胞出现凋亡.免疫细胞化学染色可见诱导后的MG63/pMDNA3-anti-Survivin Survivin蛋白表达明显降低.Annexin V染色后发现pMDNA3-anti-Survivin细胞,在ZnSO4诱导48 h后凋亡率达到11%,较对照组高出3倍.[结论] Survivin的反义RNA能够有效的抑制Survivin的表达,从而抑制肿瘤生长,并促进肿瘤细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范清宇	第四军医大学第二附属医院全军骨科中心	248	1657	18.0	27.0
2	张勇	第四军医大学第二附属医院全军骨科中心	126	711	13.0	19.0
3	黄立军	第四军医大学第二附属医院全军骨科中心	69	436	11.0	17.0
4	马保安	第四军医大学第二附属医院全军骨科中心	178	969	13.0	18.0
5	李存孝	第四军医大学第二附属医院全军骨科中心	27	220	7.0	14.0
6	杨形涛	第四军医大学第二附属医院全军骨科中心	2	9	1.0	2.0