猪传染性胃肠炎病毒聚合酶基因反义RNA对病毒的抑制作用

• 作者: 于晓龙 张海峰 李一经
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪传染性胃肠炎病毒 反义RNA 逆转录病毒表达载体
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 微生物学
• 页码范围: 85-88
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 2839字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2006.02.001

摘要

通过PCR扩增出猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)聚合酶部分片段,反向插入逆转录病毒表达载体pLXSN中,用脂质体法将重组质粒plxas-pol转染PA317细胞,经抗生素G418筛选出稳定的产毒细胞克隆,分别扩大培养后,取其上清液感染小鼠成纤维细胞NIH3T3,细胞克隆产生的重组病毒效价达9.0×105CFU/mL.用高效价假病毒感染IBRS2细胞,再经抗生素G418筛选,提取细胞克隆总RNA,经RT-PCR证明plxas-pol整合入IBRS2细胞.以TGEV感染IBRS2细胞和具有抗性的IBRS2细胞所产生的细胞病变为指标,证明该反义RNA对病毒有明显抑制作用,抑制率约为80%.用 2×103和4×102TCID50/mL剂量的TGEV感染时,引起细胞死亡的时间分别为21 h和27 h,与对照组相比,抗性细胞系可明显延迟因病毒感染引起细胞死亡的时间.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张海峰	黑龙江省农业科学院畜牧研究中心	103	224	9.0	11.0
2	李一经	东北农业大学动物医学院	219	1679	20.0	27.0
3	于晓龙		27	39	4.0	5.0