B族链球菌C5a肽酶功能活性区域的分段表达

• 作者: 周育森 岳丽琴 杨永弘 林粱 沈叙庄
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: B族链球菌 C5a肽酶 基因表达
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 116-119
• 页数: 4页
• 分类号: R392-33
• 字数: 2916字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2006.02.004

摘要

目的表达B族链球菌C5a肽酶蛋白功能活性区域,为进一步研究及开发疫苗奠定基础.方法设计引物,从GBSⅡ型标准株的基因组DNA中扩增出含有C5a肽酶蛋白不同功能区域基因的4个目的片段,分别插入T载体,再经酶切后,插入原核表达载体PET32a,进行融合表达.对表达蛋白进行免疫原性检测,并通过镍柱大量纯化.结果成功构建4个目的片段的PET表达质粒.经SDS-PAGE检测表达的融合蛋白相对分子质量分别为80 000、78 000、70 000和36 000.蛋白质谱分析证实,表达的4个蛋白为B族链球菌C5a肽酶蛋白的可能性分数分别为82、152、113和79.免疫印迹证实均能与特异性抗C5a肽酶蛋白的抗体反应,纯化后的蛋白SDS-PAGE纯度达90%.结论已成功地表达了可溶性C5a肽酶蛋白4个功能活性区域,为蛋白免疫表位和毒力机制的研究以及亚单位蛋白疫苗的制备奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周育森	军事医学科学院流行病学研究所	75	354	8.0	16.0
2	杨永弘	北京儿童医院微生物及免疫室	24	167	8.0	12.0
3	沈叙庄	北京儿童医院微生物及免疫室	17	81	6.0	8.0
4	岳丽琴	北京儿童医院微生物及免疫室	7	40	5.0	6.0
5	林粱		2	10	2.0	2.0