EB病毒潜伏膜蛋白2A诱导细胞毒性T细胞抗鼻咽癌的体内外实验

• 作者: 丁传林 俞晨杰 姚堃 孙华 徐洁洁 李百周 陆美萍 陈曦
• 来源期刊: 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 鼻咽肿瘤 疱疹病毒4型,人 膜蛋白 树突细胞 T淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 54-59
• 页数: 6页
• 分类号: R73
• 字数: 5328字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1673-0860.2006.01.015

摘要

目的观察EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)-潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein 2A,LMP2A)转染人树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导特异性细胞毒性T细胞(cytotoxicity T lymphocyte,CTL)的体外生物学特性;建立表达EBV-LMP2A的裸鼠鼻咽癌动物模型,探讨LMP2A特异性CTL在荷瘤鼠体内的抗肿瘤效应.方法分离人外周血单核细胞(pripheral blood mononuclear cell,PBMC),以粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-monocyte colony stimulating factor,GM-CSF)、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导培养获得DC,荧光激活细胞分选仪(fluorescence activated cell sorter,FACS)检测成熟DC的表面分子表达.用LMP2A重组腺病毒转染成熟DC,将转染DC与自体PBMC混合培养,在白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)作用下诱导针对LMP2A的特异性CTL,FACS检测CTL群体中阳性细胞的组成.将鼻咽癌CNE细胞接种BALB/c裸鼠,建立鼻咽癌动物模型;在裸鼠肿瘤局部注射LMP2A特异性CTL,观察治疗后移植瘤生长情况及病理变化.结果人外周血PBMC体外在GM-CSF、IL-4、TNF-α诱导下获得典型形态及表型特征的成熟DC.FACS检测表明,以LMP2A重组腺病毒转染DC诱导的CTL细胞群体以CD4、CD8阳性细胞组成为主.在接种CNE细胞3周后建立表达EBV-LMP2A的裸鼠鼻咽癌动物模型;动物体内实验表明注射CTL的裸鼠肿瘤生长缓慢,体积明显小于对照组(P<0.01);病理检查显示肿瘤局部发生液化性坏死并有淋巴细胞浸润.结论人外周血单核细胞体外经细胞因子诱导,可生成具典型特征的成熟DC.利用LMP2A重组腺病毒将LMP2A基因转入DC,可在同一个体体外诱导出针对LMP2A的特异性CTL.CNE细胞接种裸鼠,可成功构建鼻咽癌动物模型;LMP2A特异性CTL在动物体内可明显抑制鼻咽癌肿瘤的生长,发挥有效的抗肿瘤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚堃	南京医科大学微生物免疫学教研室	93	802	14.0	25.0
2	徐洁洁	南京医科大学微生物免疫学教研室	38	254	9.0	12.0
3	丁传林	南京医科大学微生物免疫学教研室	15	68	5.0	7.0
4	陆美萍	南京医科大学第一附属医院耳鼻咽喉科	34	258	8.0	14.0
5	李百周	南京医科大学第一附属医院病理科	29	176	8.0	11.0
6	陈曦	南京医科大学第一附属医院耳鼻咽喉科	52	221	7.0	11.0
7	孙华	南京医科大学微生物免疫学教研室	9	94	5.0	9.0
8	俞晨杰	南京大学医学院附属鼓楼医院耳鼻咽喉科	31	241	9.0	14.0