实时荧光定量分析SK-N-SH细胞中β-actin mRNA的半衰期

• 作者: 吕建新 胡昕
• 来源期刊: 温州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光定量 SK-N-SH β-actin mRNA 半衰期 放线菌素D
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 313-316
• 页数: 4页
• 分类号: Q291|R329.2
• 字数: 2983字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2138.2006.04.004

摘要

目的:探讨和分析SK-N-SH细胞中β-actin mRNA的半衰期.方法:建立包含β-actin基因片断的pMD-T载体的梯度稀释曲线,应用VIC标记的Taqman-MGB探针进行检测,用Opticon2.02软件分析结果.以不同浓度和不同时间的放线菌素D阻断SK-N-SH细胞转录,提取总RNA并予荧光定量RT-PCR检测β-actin mRNA.结果:SK-N-SH细胞中β-actin mRNA的半衰期为4 h.与未处理组相比,4 h组β-actin的拷贝数差异有显著性(P＜0.05),12 h和24 h组β-actin拷贝数差异有极显著性(P＜0.01).不同浓度之间放线菌素D对β-actin拷贝数的影响差异不大(P＞0.05).结论:应用实时荧光定量RT-PCR,通过比较mRNA与总RNA的拷贝数,建立了一种准确方便地检测mRNA衰减的方法.同时β-actin不适合做放线菌素D处理实验中的内参照.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕建新	温州医学院细胞与分子生物研究所	153	1535	21.0	32.0
2	胡昕	温州医学院细胞与分子生物研究所	12	41	4.0	5.0