异种血管内皮生长因子基因重组T7噬菌体疫苗对小鼠Lewis肺癌的抑制作用

• 作者: 刘岽 周彩存 唐亮 孙红梅 张培德 张尚权 李晓慧 王丽萍 谈立松
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮生长因子 噬菌体疫苗 肿瘤/免疫治疗 小鼠
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1221-1226
• 页数: 6页
• 分类号: R73
• 字数: 5807字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2006.10.006

摘要

背景与目的:肿瘤的生长、转移和新生血管生成有密切关系,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是已知作用最强、最专一的促血管生成因子.本实验采用噬菌体展示技术,构建人血管内皮生长因子重组T7噬菌体疫苗,并检验疫苗对小鼠Lewis肺癌的抑制作用.方法:用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)从人肺癌组织克隆出人VEGF165基因,将人VEGF165基因与T7Select10-3b噬菌体基因重组,构建T7 Select10-3b_VEGF噬菌体疫苗,制备噬菌体效价达到1×1013 pfu/ml.将C57BL/6J小鼠随机分为3组,T7-VEGF疫苗组10只、空白噬菌体组(T7)10只、生理盐水组(NS)10只.将各组样品与等体积弗氏佐剂混合,各组小鼠每只每周分别免疫1×1012 pfu/200μl重组噬菌体疫苗、空白噬菌体、生理盐水,共免疫4周.接种Lewis肺癌细胞,观察肿瘤的生长情况和小鼠状态.接种肿瘤14天后,处死小鼠,剥离肿瘤称重,检测小鼠血清中特异性抗VEGF抗体滴度、肿瘤微血管密度(microvesseldensity,MVD).结果:T7-VEGF疫苗组,T7组、生理盐水组肿瘤均重分别为:(0.543±0.259)g、(0.982±0.359)g、(1.169±0.460)g.疫苗组肿瘤重量明显小于生理盐水组(P＜0.01).疫苗组血清产生抗VEGF抗体滴度为1:1000.疫苗组、空白噬菌体组、生理盐水组MVD分别为:8.5±0.8,16.4±1.3,18.5±1.6.疫苗组MVD明显小于生理盐水组.结论:异种血管内皮生长因子基因重组T7噬菌体疫苗可干扰机体对自身VEGF的免疫耐受,可产生较高水平的特异性抗VEGF抗体,并具有抑制小鼠Lewis肿瘤生长的效应.