诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的体外研究

• 作者: 刘玲蓉 张其清 晏杰
• 来源期刊: 中国修复重建外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 生长因子 细胞培养 细胞诱导 小鼠
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 组织工程
• 页码范围: 1114-1118
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3837字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)、胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)在诱导骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)向软骨细胞分化过程中的相互作用,并研究细胞密度对MSCs向软骨细胞分化的影响.方法 取健康昆明种小白鼠骨髓,用全骨髓贴壁法筛选获得MSCs,体外培养传代.采用特定的诱导培养使MSCs向软骨细胞分化,按培养基内添加生长因子的不同分成3个实验组和对照组.实验组分别为:TGF-β1+IGF-1联合应用组(TGF-β1 10 ng/ml、IGF-1 50 ng/ml);TGF-β1单独应用组(TGF-β110 ng/m1);IGF-1单独应用组(IGF-1 50 ng/ml);对照组不添加任何生长因子.TGF-β1+IGF-1联合应用组于诱导14 d和21 d,分别进行甲苯胺蓝染色及免疫荧光双染法鉴定;于诱导7、14和21 d各组分别提取诱导细胞总RNA,进行RT PCR扩增,检测TGF-β1、IGF-1对诱导细胞Ⅱ型胶原表达量的影响;比较MSCs在平板培养及细胞团培养时,Ⅱ型胶原表达量的差异.结果 TGF-β1+IGF-1联合应用组诱导培养14 d,诱导软骨细胞甲苯胺蓝染色呈阳性,免疫荧光染色可见诱导软骨细胞的细胞外基质含有Ⅱ型胶原.各组基因扩增产物的凝胶电泳可见,TGF-β1+IGF-1联合应用组和TGF-β1单独应用组Ⅱ型胶原扩增片段呈阳性;IGF-1单独应用组和对照组,未见Ⅱ型胶原扩增条带;凝胶成像系统灰度扫描示Ⅱ型胶原表达量TGF-β1+IGF-1联合应用组各时间点均比TGF-β1单独应用组明显增加(P＜0.05).细胞团培养模式下,诱导细胞表达Ⅱ型胶原比平板培养模式更加显著.结论 MSCs向软骨细胞诱导分化时,IGF-1对TGF-β1有明显的促进作用;细胞培养密度提高有利于MSCs成软骨细胞表型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张其清		6	53	4.0	6.0
2	刘玲蓉		4	82	3.0	4.0
3	晏杰		1	29	1.0	1.0