缺氧诱导的肝癌靶向性基因治疗载体的构建和检测

• 作者: 孙学军 张伟 王燕 白纪刚 禄韶英
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 甲胎蛋白基因 缺氧反应元件 肝细胞癌
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 59-62
• 页数: 4页
• 分类号: R735.7|R730.54
• 字数: 3301字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.01.015

摘要

目的:构建缺氧诱导的AFP基因启动子(HRE-AFPp)调控的基因表达载体,并检测该调控元件的特异性和对缺氧诱导的反应性.方法:用PCR方法从人类基因组中扩增VEGF基因缺氧反应元件(HRE)和AFP基因启动子(AFPp),将上述片段与含有报告基因(强化绿色荧光蛋白基因)载体pEGFP-1的多克隆位点连接,构建成为缺氧诱导的AFP基因启动子调控的基因表达载体(pEGFP-[HRE]AFPp).用脂质体法将表达载体转染表达或不表达AFP的细胞系,G418筛选阳性克隆,荧光显微镜观测重组AFPp的活性,并用流式细胞术检测缺氧诱导是否对其有调控作用.结果:成功地将HRE、AFPp克隆到报告基因载体pEGFP-1的多克隆位点,酶切鉴定和DNA序列分析无误,荧光显微镜观测证实EGFP能在AFP阳性肝癌细胞特异性表达,流式细胞术检测证实,16 h缺氧诱导能增强EGFP的表达(P＜0.01).结论:缺氧诱导的AFP顺式作用元件修饰的基因治疗载体,在基因转录水平特异性调控目的基因的表达,为下一步将其作为肝癌基因治疗载体奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙学军	西安交通大学医学院第一附属医院普通外科	116	617	12.0	19.0
2	张伟	西安交通大学医学院第一附属医院普通外科	90	799	14.0	26.0
3	白纪刚	西安交通大学医学院第一附属医院普通外科	28	134	8.0	10.0
4	禄韶英	西安交通大学医学院第一附属医院普通外科	59	385	10.0	17.0
5	王燕	第四军医大学唐都医院中心实验室	54	258	8.0	12.0