葡激酶突变体Y1-Sak的体外变复性研究

• 作者: 宋后燕 王改珍 贺进田
• 来源期刊: 河北师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 葡激酶突变体 复性 包涵体
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 生物学
• 页码范围: 459-463
• 页数: 5页
• 分类号: Q510
• 字数: 3985字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-5854.2006.04.023

摘要

具有低免疫原性的双功能葡激酶突变体Y1-Sak(△15,S16K,K74A,E75A,R77A,K109R,F111D)在大肠杆菌中的表达产物为包涵体,必须进行体外变复性才能得到活性.详细研究了复性方式、pH、温度、复性的初始蛋白浓度和添加L-精氨酸对Y1-Sak的体外变复性的影响,发现复性温度和添加的L-精氨酸对Y1-Sak的复性有重要的影响.经过工艺优化后,Y1-Sak的纯化活性回收率达到40%左右,蛋白比活性由20 kU/mg提高到53 kU/mg.用动态光散射分析发现,工艺优化后复性的高比活性Y1-Sak的水合动力学半径与野生型葡激酶相近,分子基本处于单体状态.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王改珍	河北科技大学环境科学与工程学院	22	143	6.0	11.0
2	贺进田	河北师范大学生命科学学院	16	67	5.0	7.0
4	宋后燕	复旦大学教育部分子医学重点实验室	94	467	12.0	17.0