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小鼠卵母细胞的OPS法玻璃化冷冻保存技术
小鼠卵母细胞的OPS法玻璃化冷冻保存技术
作者:
侯云鹏
吴通义
周光斌
朱士恩
李秀伟
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
卵母细胞
开放式拉长细管法
冷冻
玻璃化
小鼠
摘要:
目的以小鼠卵母细胞为模型,利用开放式拉长细管(open pulled straw,OPS)法研究在不同条件下冷冻、解冻对其发育能力的影响,为家畜、濒危动物乃至人类探索一种简易、高效的卵母细胞冷冻保存提供理论与技术参考.方法在室温(25℃±0.5℃)条件下,以乙二醇(EG)、DMSO为主体抗冻保护剂配制成的玻璃化溶液(EFS、EDFS),采用OPS法对卵母细胞进行玻璃化冷冻保存.实验一:操作台温度分别为25℃±0.5℃和37℃±0.5℃时,卵母细胞在10%EG+10%DMSO或10%EG溶液中预处理30 s,移入EDFS或EFS中平衡15 s~45 s进行冷冻保存;实验二:操作台为37℃±0.5℃条件下,采用三种方法(卵母细胞在A:0.5 mol/L和0.3 mol/L的蔗糖中分别处理2 min和5 min;B:0.3 mol/L和0.15 mol/L的蔗糖中分别处理5 min和2 min;C:0.5 mol/L的蔗糖处理5 min)对EDFS30和EDFS40冷冻保存的卵母细胞进行解冻;实验三:解冻后的卵母细胞在SrCl2溶液中进行孤雌激活.结果与结论 实验一中卵母细胞解冻后的形态正常率分别高达92.1%(25℃±0.5℃)和92.5%(37℃±0.5℃),均与对照组(98.9%)无显著性差异(P>0.05);实验二中卵母细胞解冻以C法效果最佳(形态正常率分别为92.5%和67.5%);实验三中解冻后在mCZB中培养0.5 h的卵母细胞激活效果优于未培养组(卵裂率和囊胚发育率分别为80.0%vs.57.7%;18.2%vs.0),均有显著或极显著差异(P<0.05或P<0.01);而培养组与新鲜对照组卵母细胞激活后卵裂率和桑椹胚发育率与对照组(80.0%vs.77.8%;52.8%vs.61.9%)均无显著性差异(P>0.05).
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篇名
小鼠卵母细胞的OPS法玻璃化冷冻保存技术
来源期刊
中国比较医学杂志
学科
农学
关键词
卵母细胞
开放式拉长细管法
冷冻
玻璃化
小鼠
年,卷(期)
2006,(3)
所属期刊栏目
技术方法
研究方向
页码范围
179-184
页数
6页
分类号
S814.8
字数
5027字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1671-7856.2006.03.013
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
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被引次数
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1
朱士恩
105
1093
18.0
27.0
5
周光斌
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6
侯云鹏
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117
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10.0
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吴通义
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李秀伟
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开放式拉长细管法
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小鼠
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研究来源
研究分支
研究去脉
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中国比较医学杂志
主办单位:
中国实验动物学会
中国医学科学院医学实验动物研究所
出版周期:
月刊
ISSN:
1671-7856
CN:
11-4822/R
开本:
16开
出版地:
北京市朝阳区潘家园南里5号
邮发代号:
创刊时间:
1991
语种:
chi
出版文献量(篇)
4463
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15
总被引数(次)
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