耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a转肽酶区的克隆表达及纯化鉴定

• 作者: 徐霞 杜晶春 谢闺娥
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 青霉素结合蛋白2a 转肽酶区 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 mecA基因
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 543-545
• 页数: 3页
• 分类号: Q785|Q786
• 字数: 2697字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2006.04.016

摘要

目的:对编码耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)青霉素结合蛋白2a(PBP2a)转肽酶区的mecA基因片段进行克隆、表达、纯化及鉴定.方法:根据基因文库登录的mecA基因的编码序列,设计合成了一对寡核苷酸引物,应用PCR技术从MRSA基因组DNA中扩增获得编码PBP2a转肽酶区的DNA片段,将此目的基因片段克隆至pET-His载体,经酶切鉴定、测序正确后,转化E.coli BL21(DE3)plysS;用IPTG进行诱导表达后,利用Ni2+亲和层析技术从表达蛋白中纯化目的蛋白;对表达的蛋白以MRSA胶乳凝集试剂盒进行鉴定.结果:成功构建了PBP2a转肽酶区原核表达载体,并获得了高效表达,制备了高纯度的目的蛋白.结论:获得了高纯度的PBP2a转肽酶区蛋白,为其进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐霞	广州医学院检验系	69	314	10.0	13.0
2	谢闺娥	广州医学院检验系	8	82	4.0	8.0
3	杜晶春	广州医学院检验系	11	23	3.0	4.0