检测家畜血吸虫抗体的二步金标免疫渗滤法研究

• 作者: 付媛 俞国乔 冯尚连 刘恩勇 卢福庄 周永学 张雪娟 方兰勇 方萍萍 朱家新 樊茂华 毛光琼 程菊芬 郑海平 陈伟杰
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 二步金标免疫渗滤法 血吸虫病 抗体 家畜
• 年，卷（期）: 2006,（7）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 687-692
• 页数: 6页
• 分类号: S854.4+3|S855.9
• 字数: 5069字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2006.07.012

摘要

将待检家畜血纸浸出液点在硝酸纤维素膜上,以金标记的血吸虫虫卵可溶性抗原为探针(以下简称血吸虫抗原胶体金),建立了检测家畜血吸虫抗体的二步金标免疫渗滤法(Two-step Dot Immunogold Filtration Assay,T-DIGFA).家畜血吸虫病阳性血样在50～90 s形成肉眼可观察的红色斑点,可进行快速诊断.该法可以检测出人工感染血吸虫尾蚴7 d和7 d以上的阳性牛和兔血纸抗体,与肝片吸虫、锥虫、蛔虫病之间无交叉反应.T-DIGFA检测粪孵血吸虫毛蚴阳性牛血纸139份、阴性牛血纸130份,与粪孵法阳性符合率为100%,阴性符合率为99.2%;-DIGFA与斑点酶联SPA法阳性符合率和阴性符合率完全相同.血吸虫抗原胶体金在4～8℃保存期可达6个月、室温保存期为3个月.试验证实,T-DIGFA有很高的敏感性、特异性、重复性和稳定性,适合于基层单位和现场进行家畜血吸虫病抗体的快速诊断、普查和检疫.