微量核酸样品的双重限制性荧光标记技术

• 作者: 丁大鹏 周珏宇 欧阳谦 石嵘 郑文岭 陈秋霞 马文丽 黄吉城
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 双重限制性荧光标记 限制性显示技术 基因芯片
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 534-537
• 页数: 4页
• 分类号: R9
• 字数: 2361字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2006.05.018

摘要

目的采用双重限制性荧光标记技术(double restriction fluorescent labeling,DRFL)标记微量核酸样品,提高基因芯片用于病原体检测的灵敏度.方法以限制性显示技术处理SARS-CoV核酸样品,分别采用传统限制性荧光标记技术(直接采用荧光标记的通用引物标记)和双重限制性荧光标记技术(荧光标记的通用引物和荧光标记的dNTP的双重荧光标记)标记,进一步在同等条件下与基因芯片进行杂交、清洗和芯片扫描检测.通过对杂交结果的分析,比较2种标记方法的标记效果.结果以DRFL方法标记SARS基因片段,其荧光强度均值比传统荧光标记方法提高了3.5835倍.结论 DRFL技术有效地提高单位分子标记片段的荧光强度值,提高了检测的灵敏度,可用于微量病原体核酸样品的基因芯片检测.