胰岛素对体外培养兔骨骼肌肌管蛋白降解的调节作用

• 作者: 冯瑞 尹会男 杨红明 柴家科 申传安 盛志勇
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肌纤维 肌,骨骼 胰岛素 地塞米松 泛素 蛋白质类
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 代谢调节及肠黏膜维护
• 页码范围: 262-265
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3753字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2006.04.007

摘要

目的 观察胰岛素对体外培养兔骨骼肌肌管蛋白降解的调节作用.方法 无菌分离幼兔下肢骨骼肌肌肉,采用组织块法分离、培养成肌细胞,待其融合形成肌管,采用L-[3,5-3H]-酪氨酸标记肌管内蛋白后,随机分为对照组(用含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液培养)、胰岛素组(用含100 nmol/L胰岛素+体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液培养)、地塞米松组(用含100 nmol/L地塞米松+体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液培养)和胰岛素+地塞米松组(用含100 nmol/L胰岛素+100 nmol/L地塞米松+体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液培养),每组含24孔肌管.培养24 h后,应用液体闪烁计数仪测定培养液和肌管内L-[3,5-3H]-酪氨酸的含量,计算肌管内蛋白的降解率.RNA印迹法测定肌管内泛素-蛋白酶体C2亚基mRNA的表达水平,以其与内参照甘油醛-3-磷酸脱氢酶的灰度值之比表示.结果 肌管内蛋白的降解比:地塞米松组为0.50±0.03,明显高于对照组(0.38±0.04,P＜0.01);胰岛素组为0.35±0.03,明显低于对照组(P＜0.05);胰岛素+地塞米松组为0.41±0.03,明显低于地塞米松组(P＜0.01),但仍高于对照组(P＜0.05).肌管内泛素-蛋白酶体C2亚基的mRNA表达水平:与对照组(泛素2.4 kb条带为0.82±0.15、1.2kb条带为0.60±0.10,C2亚基为0.75±0.16)比较,地塞米松组(泛素2.4 kb条带为2.15±0.23、1.2 kb条带为1.50±0.14,C2亚基为1.50±0.13)明显升高(P＜0.01);胰岛素+地塞米松组(泛素2.4 kb条带为1.25±0.17、1.2 kb条带为0.85±0.09,C2亚基为0.90±0.15)明显低于地塞米松组(P＜0.01);胰岛素组(泛素2.4 kb条带为0.85±0.07、1.2 kb条带为0.65±0.12,C2亚基为0.76±0.09)与对照组相近(P＞0.05).结论 胰岛素对兔骨骼肌肌管内泛素-蛋白酶体途径的活性和蛋白代谢分别有较弱的促进与抑制作用,但能有效拮抗地塞米松诱导的该途径活性的增强和蛋白的高降解,其机制尚有待进一步探讨.