四嗪二甲酰胺对白血病细胞株HL-60体外作用的研究

• 作者: 刘建栋 吕亚萍 周永列 杨忠愚 王文松 胡惟孝 邱莲女
• 来源期刊: 中国临床药理学与治疗学
• 关键词: 四嗪二甲酰胺 细胞株HL-60 细胞凋亡 细胞分化
• 年，卷（期）: 2006,（9）
• 所属期刊栏目: 研究原著
• 页码范围: 1006-1012
• 页数: 7页
• 分类号: R965.2|R966
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2501.2006.09.011

摘要

目的:观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)体外抑制白血病细胞株HL-60增殖,诱导细胞分化和凋亡作用,并对其作用机制进行初步探讨.方法:将不同浓度的ZGDHu-1与HL-60细胞在体外培养,台盼蓝染色、MTT比色法观察对HL-60细胞增殖的抑制作用;用细胞形态学、DNA凝胶电泳、DNA含量及细胞周期分析、Annexin-V/PI双标记和DNA片段原位末端标记法等分析细胞凋亡.通过NBT试验、细胞表面抗原CD11b、CD13、CD14、CD64和细胞形态学检测ZGDHu-1对HL-60细胞的分化作用.用Rh123/PI测定线粒体跨膜电位(ΔΨm),用流式细胞术检测Bcl-2、Bax、 P53、Fas和线粒体膜蛋白的表达变化.结果:ZGDHu-1呈现作用时间和剂量的量效性抑制HL-60细胞增殖和活力,10 ng·ml-1 ZGDHu-1作用HL-60细胞24～72 h 后,MTT法检测细胞增殖抑制率分别为(7.3±0.3)%、(15.8±1.0)%和(21.3±1.2)%,均显著高于对照组(P＜0.01);48 h、72 h 的IC50分别为180、180 ng·ml-1. HL-60细胞经ZGDHu-1作用后,大部分细胞阻滞于G2-M期,G0/1期细胞减少;出现典型的细胞形态改变,DNA片端化,经50～1 000 ng·ml-1的ZGDHu-1作用后,SubG1由(3.2±1.6)%上升至(67.7±5.9)%,与对照组(0.7±0.5)%比较,具有显著性差异(P＜0.05),Annexin-V/PI标记升高,TUNEL染色后的凋亡细胞的特征性改变等均证实ZGDHu-1能诱导HL-60细胞凋亡.HL-60细胞经10～100 ng·ml-1 ZGDHu-1作用 3 d 后,细胞发生部分分化,NBT阳性率增加,细胞表面CD11b、CD13、CD14、CD64表达增加.ZGDHu-1诱导HL-60细胞凋亡和分化过程中,Bcl-2表达无变化,但Bax表达显著增加,Bax/Bcl-2的比值升高,Fas表达增强,而P53表达无变化.随ZGDHu-1作用的浓度增加,ΔΨm下降、而线粒体膜蛋白表达显著升高.结论:ZGDHu-1能抑制HL-60细胞增殖和细胞活力,低浓度时诱导HL-60细胞向粒单系分化,高浓度时促进细胞凋亡,其机制可能与Bax表达上调,线粒体膜电位下降等有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周永列	浙江省人民医院中心实验室	159	768	12.0	20.0
2	邱莲女	浙江省人民医院中心实验室	84	386	9.0	16.0
3	杨忠愚	浙江工业大学药学院	24	225	8.0	14.0
4	胡惟孝	浙江工业大学药学院	68	383	10.0	15.0
5	刘建栋	浙江省人民医院中心实验室	64	503	12.0	19.0
6	吕亚萍	浙江工业大学药学院	35	203	8.0	12.0
7	王文松	浙江省人民医院中心实验室	28	145	8.0	10.0